碱胁迫应答基因GsARHP的克隆及转基因紫花苜蓿的耐碱性分析

作     者：陈冉冉 朱娉慧 贾博为 宋雪薇 王子君 李佶娜 李强 丁晓东 朱延明 CHEN Ran-Ran;ZHU Ping-Hui;JIA Bo-Wei;SONG Xue-Wei;WANG Zi-Jun;LI Ji-Na;LI Qiang;DING Xiao-Dong;ZHU Yan-Ming

作者机构：东北农业大学农业生物功能基因重点实验室，黑龙江 哈尔滨 150030 

基　　金：国家自然科学基金项目(31171578) 黑龙江省高校科技创新团队建设计划项目(2011TD005) 东北农业大学学科团队建设项目-团队1资助 

出 版 物：《草业学报》 (Acta Prataculturae Sinica)

年 卷 期：2017年第26卷第9期

页      码：92-103页

摘      要：本研究基于实验室前期野生大豆碱胁迫转录组数据,筛选出一个碱胁迫下上调表达的假定蛋白基因,暂命名为GsARHP(alkali stress related hypothetical protein gene)。首先利用Real-time PCR方法验证了GsARHP基因受碱胁迫诱导表达。生物信息学分析表明,该基因编码一个含有130个氨基酸的亲水蛋白,含有信号肽但无跨膜结构域;构建了GsARHP植物超量表达载体,利用农杆菌介导的子叶节侵染法转化肇东紫花苜蓿,通过PCR,Southern Blot和RT-PCR方法检测获得了3个超量表达GsARHP基因的转基因株系,并对其耐碱性进行了分析。结果表明,在0,100和150mmol/L NaHCO3处理14d后,非转基因株系明显萎蔫、黄化甚至死亡,而转基因株系则长势良好;进一步分析其生理指标显示,相对质膜透性与丙二醛含量均显著低于非转基因株系(P<0.01),而叶绿素含量与CAT活性显著高于非转基因株系(P<0.01),说明GsARHP基因的超量表达可以增强紫花苜蓿的耐碱能力。

主 题 词：野生大豆 GsARHP基因 碱胁迫 紫花苜蓿 遗传转化 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 090503[090503] 0909[0909] 07[理学] 0905[农学-林学类] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.11686/cyxb2016464

馆 藏 号：203262994...