抑制MCF-7乳癌细胞VEGF表达对树突细胞免疫功能影响

作     者：王海燕 谭丽莉 江彩玉 葛银林 

作者机构：青岛大学医学院附属医院输血科山东青岛266003 青岛市医疗保险管理中心 青岛大学医学院生物化学教研室 

出 版 物：《青岛大学医学院学报》 (Acta Academiae Medicinae Qingdao Universitatis)

年 卷 期：2009年第45卷第4期

页      码：335-338,342页

摘      要：目的探讨抑制MCF-7乳癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)的表达对树突细胞(DC)免疫功能的影响。方法针对VEGF基因设计小干扰RNA(siRNA),以脂质体转染法将siRNA导入乳癌细胞MCF-7,RT-PCR检测干扰VEGF基因后mRNA的表达,Western blotting法检测VEGF蛋白的表达,观察VEGF基因沉默效果。以MCF-7乳癌细胞的培养上清和干扰VEGF基因后MCF-7乳癌细胞培养上清液同时添加粒-单细胞集落刺激因子、白细胞介素-4、肿瘤坏死因子α培养正常异基因DC,利用MTT法和Hoechst33258检测DC刺激正常外周血T细胞增殖的能力及DC激发的细胞毒T淋巴细胞(CTL)杀伤活性;ELISA法检测DC培养上清液中白细胞介素12(IL-12)及DC与外周血单个核细胞(PBMC)共同培养液中干扰素γ(IFN-γ)的含量。结果VEGF基因经siRNA处理24 h后,MCF-7乳癌细胞VEGF mRNA和蛋白的表达明显降低,其诱生的DC与MCF-7乳癌细胞培养上清液诱生的DC相比,siRNA处理DC刺激T淋巴细胞增殖能力、CTL杀伤活性以及DC分泌IL-12和协同刺激外周血PBMC分泌INF-γ的能力明显增强。结论siRNA可靶向抑制乳癌MCF-7细胞VEGF的表达,下调VEGF后的MCF-7细胞上清液对DC分化成熟及功能的抑制作用明显降低。

主 题 词：树突细胞 血管内皮生长因子 RNA干扰 MCF-7细胞 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1672-4488.2009.04.008

馆 藏 号：203263030...