重组人巨细胞病毒嵌合肽基因在毕赤酵母中的克隆和表达

作     者：谢琪璇 余巍 潘善培 肖銮娟 彭雅林 张春雪 XIE Qi-xuan;YU Wei;PAN Shan-pei;XIAO Luan-juan;PENG Ya-ling;ZHANG Chun-xue

作者机构：暨南大学生殖免疫研究所广州510632 

基　　金：深圳市科技计划重点资助项目 

出 版 物：《中国生物工程杂志》 (China Biotechnology)

年 卷 期：2005年第25卷第3期

页      码：29-34页

摘      要：为了在毕赤酵母中表达带有组氨酸纯化标记的重组人巨细胞病毒嵌合肽 (rHCMVp) ,根据其基因序列 ,设计引物从pPIC9K rHCMVp上扩增得到目的基因片段 ,并导入毕赤酵母诱导型表达载体pPICZαA中。通过电击将线性化的重组质粒转化到毕赤酵母X33细胞中 ,筛选获得表达量较高的重组菌株 ,研究了该菌株生长的培养条件 ,包括不同诱导时间、甲醇浓度、pH值对人巨细胞病毒嵌合肽表达的影响。 2L发酵罐进行了高密度发酵 ,经 1 %的甲醇、pH6 0的条件下诱导48h ,最终菌体密度OD60. 0 达到 1 80 ,每升发酵液中含目的蛋白 78. 7mg ,产量比摇瓶提高了 4 8倍。rHCMVp可通过高密度发酵大量获得。

主 题 词：人巨细胞病毒 HCMV 克隆和表达 诱导型 目的基因 毕赤酵母 重组质粒 嵌合肽 表达载体 表达量 

学科分类：07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 090102[090102] 0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13523/j.cb.20050306

馆 藏 号：203264914...