小鼠PARP-1基因RNAi表达质粒的构建与筛选

作     者：王铁君 韩成敏 李星花 尹金植 陈玉丙 王红勇 李英普 WANG Tie-jun△,HAN Cheng-min,LI Xing-hua,et al(△Department of Radiotherapy,The Second Hospital of Jilin University,Changchun 130012,China)

作者机构：吉林大学第二医院肿瘤放疗科长春130012 吉林大学口腔医院内镜中心长春130012 吉林大学第一医院呼吸内科长春130012 

基　　金：吉林省科技发展计划项目 吉林省科委白求恩专项基金(200705224) 

出 版 物：《中国生物制品学杂志》 (Chinese Journal of Biologicals)

年 卷 期：2009年第22卷第2期

页      码：143-146页

摘      要：目的构建并筛选小鼠聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶-1(PARP-1)基因的RNAi表达质粒,为肿瘤基因治疗探索新途径。方法根据GenBank中报道的PARP-1基因序列及shRNA设计原则,设计、合成用于构建RNAi质粒的寡核苷酸,构建4种重组PARP-1RNAi质粒,酶切及测序鉴定正确后,以脂质体LipofectamineTM2000介导转染小鼠Lewis肺癌细胞株。48h后,采用RT-PCR技术检测转染细胞中PARP-1基因mRNA的转录水平,筛选有效的PARP-1RNAi质粒。结果4种重组PARP-1RNAi质粒经酶切及测序证明构建正确。转染后48h,转染质粒pGPU6/GFP/Neo-PARP-1-1308和pGPU6/GFP/Neo-PARP-1-1837的Lewis细胞PARP-1基因mRNA的转录水平降低,转染pGPU6/GFP/Neo-PARP-1-1308组下降更明显,以其作为后续实验的有效质粒。结论已成功构建并筛选出PARP-1基因的RNAi表达质粒,为PARP-1基因RNAi治疗肿瘤的研究奠定了基础。

主 题 词：聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶-1 siRNA 肿瘤 基因治疗 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0703[理学-化学类] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.13200/j.cjb.2009.02.44.wangtj.005

馆 藏 号：203264924...