结核分枝杆菌耐药相关基因扩增多重PCR体系的建立与评估

作     者：李自慧 潘丽萍 孙琦 吕翎娜 杜博平 张洪静 孙照刚 张宗德 LI Zi-hui;PAN Li-ping;SUN Qi;LY Ling-na;DU Bo-ping;ZHANG Hong-jing;SUN Zhao-gang;ZHANG Zong-de

作者机构：首都医科大学附属北京胸科医院北京市结核病胸部肿瘤研究所耐药结核病研究北京市重点实验室101149 

基　　金：“十二五”国家科技重大专项(2015ZX1004801-003) 重大传染病防治协同创新中心项目(PXM2016_014226_000052) 北京市自然科学基金(7164245) 北京市科技新星计划(Z161100004916080) 北京市医院管理局“青苗”计划专项(QML20151501) 

出 版 物：《中国防痨杂志》 (Chinese Journal of Antituberculosis)

年 卷 期：2017年第39卷第8期

页      码：793-798页

摘      要：目的建立结核分枝杆菌耐药相关基因多重PCR反应体系，评估该体系以临床分离株DNA和痰菌DNA为模板扩增耐药相关基因的成功率。方法常规提取结核分枝杆菌临床分离株（47株）及涂阳肺结核患者（21例）痰菌DNA。根据目前研究已发现的结核分枝杆菌耐药相关基因合成引物，建立2个多重PCR体系以扩增目的基因。扩增片段经测序证实后，计算该体系用于两种样本的扩增成功率。结果针对临床常用8种抗结核药物，选取结核分枝杆菌rpoB、katG、inhA、embB、gyrA、rpsL、rrs、eis共8个耐药相关基因设计合成引物。建立2个多重PCR体系扩增8个耐药基因，该体系扩增47株结核分枝杆菌临床分离株DNA和21例菌阳肺结核患者痰菌DNA的成功率分别为100．0％（47／47）和76．2％（16／21）。结论本研究建立了高效扩增8个结核分枝杆菌耐药基因的多重PCR体系，结果对进一步研发结核病耐药分子诊断产品具有重要意义。

主 题 词：结核,抗多种药物性 聚合酶链反应 基因测定 核酸扩增技术 技术评估,生物医学 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-6621.2017.08.002

馆 藏 号：203265678...