疟疾巢式PCR检测方法的优化应用

作     者：张耀光 江莉 王真瑜 蔡黎 ZHANG Yao-guang;JIANG Li;WANG Zhen-yu;CAI Li

作者机构：上海市疾病预防控制中心上海200336 

出 版 物：《中国血吸虫病防治杂志》 (Chinese Journal of Schistosomiasis Control)

年 卷 期：2017年第29卷第4期

页      码：449-453,463页

摘      要：目的结合疟疾检测工作实际,对疟疾基因检测的巢式PCR方法进行优化应用,以提高疟疾检测效率。方法通过采用PCR预混液、内引物一步扩增、重新设计针对卵形疟多个亚种的新引物,在疟疾巢式PCR的基础对反应体系、反应条件和卵形疟原虫特异性引物进行优化。对优化后的方法进行特异性和敏感性分析,并用巢式PCR和优化后的方法同时对疟疾阳性血样和疟疾送检血样进行检测,对检测结果进行比较分析。结果优化后的方法特异性较好,敏感性可达pg至fg级。两种方法同时检测疟疾阳性血样的结果表明,优化后的方法PCR扩增产物的产量无明显变化,非特异性扩增明显减少,卵形疟不同亚种的检出率提高,总体特异性提高。对111份疟疾送检血样的实测结果表明,巢式PCR的敏感性和虫种特异性分别为94.57%和86.96%,优化后方法的敏感性和虫种特异性均为93.48%,两种方法敏感性差异无统计学意义(P>0.05),但优化后的方法特异性明显提高(P<0.05)。结论优化后的PCR检测在保持常规巢式PCR方法敏感性的基础上提高了特异性,同时因其实验环节减少而节省了检测成本、提高了检测效率。

主 题 词：疟疾 巢式PCR 卵形疟原虫 优化应用 敏感性 特异性 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1004[医学-公共卫生预防医学类] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 0906[农学-水产类] 100201[100201] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.16250/j.32.1374.2016262

馆 藏 号：203266670...