DHAV-3 VP1蛋白优势抗原区的初步鉴定

作     者：崔嘉琦 张雪莲 刘悦 戚海惠 张忠 张桂红 王君伟 马波 CUI Jiaqi;ZHANG Xuelian;LIU Yue;QI Haihui;ZHANG Zhong;ZHANG Guihong;WANG Junwei;MA Bo

作者机构：东北农业大学动物医学学院哈尔滨150030 大成农牧(黑龙江)有限公司哈尔滨150525 华南农业大学兽医学院广州510642 

基　　金：2013年度黑龙江省博士后资助项目(LBH-Z1 3021) 

出 版 物：《黑龙江畜牧兽医》 (Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine)

年 卷 期：2017年第9期

页      码：53-57页

摘      要：为了研究鸭甲肝病毒3型(DHAV-3)VP1蛋白的优势抗原区,试验根据DHAV-3 VP1基因序列设计4对特异性表达引物,用PCR获得VP1-a^d基因片段,并在p ET-30a(+)/Rosetta(DE3)p LysS系统中进行原核表达;经IPTG诱导重组蛋白获得表达,用Ni-NTA柱亲和层析获得纯化的重组蛋白;同时以DHAV-3病毒为免疫原制备鼠抗DHAV-3多克隆抗体,通过I-ELISA和Westernblot初步鉴定。结果表明:p ET-30a-VP1-a、p ET-30a-VP1-b、p ET-30a-VP1-c和p ET-30a-VP1-d与鼠抗DHAV-3多克隆抗体都发生反应,抗原量相同的情况下VP1-c和VP1-d段显色较VP1-a和VP1-b深,说明这两段反应性相对较强;4种截短蛋白与鸭抗DHAV-3阳性血清进行反应,只有p ET-30a-VP1-c显色。说明VP1-c免疫原性较强,DHAV-3 VP1蛋白的90~175 aa为其优势抗原区。

主 题 词：鸭甲肝病毒3型(DHAV-3) VPl 表达 多克隆抗体 优势抗原区 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2017.1513

馆 藏 号：203268784...