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p53基因突变子175 H、248 W和273 H的定点突变及表达载体的构建

p53基因突变子175 H、248 W和273 H的定点突变及表达载体的构建

作     者:刘扬 赵银龙 刘晓冬 马淑梅 龚守良 刘树铮 LIU Yang;ZHAO Yin-long;LIU Xiao-dong;MA Shu-mei;GONG Shou-liang;LIU Shu-zheng

作者机构:吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室吉林长春130021 

基  金:国家自然科学基金资助课题(30500142) 教育部留学回国人员科研启动基金资助课题(2005) 吉林省科技发展项目资助课题(2005136) 吉林大学科技创新基金资助课题(2004) 

出 版 物:《吉林大学学报(医学版)》 (Journal of Jilin University:Medicine Edition)

年 卷 期:2006年第32卷第4期

页      码:543-546页

摘      要:目的:定点诱变合成p53基因突变子进而构建表达载体。方法:以野生型p53基因为模板,采用PCR体外定点突变技术,设计2对引物,将突变位点设计在引物上,通过重叠延伸法2次PCR扩增,扩增片段上含有所需要的突变位点,最后将扩增片段克隆入pcDNA3.1载体中。结果:在预期位点已经发生突变,p53基因第175位密码子由精氨酸(cgc)突变为组氨酸(cac),第248位密码子由精氨酸(cgg)突变为色氨酸(tgg),第273位密码子由精氨酸(cgt)突变为组氨酸(cat)。p53基因突变子表达载体成功构建。结论:PCR技术诱导定点突变准确、高效。基因突变体的成功构建,为进一步研究该突变位点奠定了基础。

主 题 词:基因,p53 突变子,定点突变,遗传载体,聚合酶链反应/方法 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1671-587X.2006.04.001

馆 藏 号:203270475...

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