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致病性嗜水气单胞菌多重PCR检测方法的建立

致病性嗜水气单胞菌多重PCR检测方法的建立

作     者:饶静静 李寿崧 黄克和 江树勋 潘群兴 RAO Jing-jing;LI Shou-song;HUANG Ke-he;JIANG Shu-xun;PAN Qun-xing

作者机构:南京农业大学动物医学院江苏南京210095 福建出入境检验检疫局福建福州350002 

基  金:国家自然科学基金资助项目(30671547) 福建省科技厅重点项目(2004Y046) 

出 版 物:《中国水产科学》 (Journal of Fishery Sciences of China)

年 卷 期:2007年第14卷第5期

页      码:749-755页

摘      要:致病性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)是近年中国各地大规模流行的淡水养殖鱼类暴发性疾病的主要病原,本研究针对GenBank中登录的致病性嗜水气单胞菌的气溶素基因(hlyA)、溶血素基因(aerA)以及为气单胞菌属所特有的内参照基因16S rRNA保守区设计了3对特异性引物,通过进行多重PCR反应体系优化,多重PCR产物的测序鉴定与特异性和敏感性实验,试图建立一种检测致病性嗜水气单胞菌的多重PCR检测方法。对8株嗜水气单胞菌、16株相关菌株进行多重PCR检测,结果显示,非致病性分离株均未扩增出毒力基因hlyA和aerA,而致病性分离株则至少含有hlyA基因;对40份送检的水产动物样品进行多重PCR检测,结果与常规微生物学检测符合率为97.5%。多重PCR检测方法具有较高的敏感性与特异性,最低可检测模板量为10 ng的样品。该方法的建立对水产动物嗜水气单胞菌病的快速诊断和分子流行病学的调查有重要意义。

主 题 词:嗜水气单胞菌 hlyA基因 aerA基因 多重PCR 

学科分类:0906[农学-水产类] 09[农学] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:1005-8737.2007.05.007

馆 藏 号:203270789...

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