小鼠骨髓树突状细胞的培养扩增及生物学特性分析

作     者：彭福华 钟秀风 胡学强 王敦进 朱灿胜 王玉鸽 Peng Fu-hua;Zhong Xiu-feng;Hu Xue-qiang;Wang Dun-jin;Zhu Can-sheng;Wang Yu-ge

作者机构：中山大学附属第三医院神经科广东省广东市510630 中山大学眼科中心病理科广东省广州市510630 

基　　金：中山大学临床医学研究5010计划(2007027) 广东省自然科学基金(8151008901000104) 广东省科技计划项目(2006B36004003) 

出 版 物：《中国组织工程研究与临床康复》 (Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2008年第12卷第B12期

页      码：10547-10550页

摘      要：背景:树突状细胞是目前已知功能最强的专职性抗原递呈细胞,但树突状细胞在体内分布广泛且数量较少,获得大量的树突状细胞是研究树突状细胞特性和功能的前提。目的:建立小鼠骨髓源树突状细胞体外培养和扩增方法,观察其形态和相关特征。设计、时间及地点:树突状细胞形态学观察实验,于2006-08/2007-05在中山大学中山眼科中心实验室完成。材料:健康雌性C57BL/6小鼠。方法:在无菌条件下提取C57BL/6鼠骨髓细胞,分离单个核细胞,以小鼠重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素4协同诱导下培养,加用磷酸脂多糖刺激,分成磷酸酯多糖-树突状细胞和单纯树突状细胞组,前者在培养加入磷酸酯多糖,后者不加。主要观察指标:应用光镜和电镜下观察树突状细胞的形态,流色细胞仪检测鉴定其生物学特征。结果:体外培养2周后具有典型的树突状细胞形态,光镜下显示细胞表面不规则,呈树突状突起,电镜下可见培养的细胞具有典型树突状细胞的形态特征,流式细胞鉴定为髓系树突状细胞,高表达MHCII类分子及共刺激分子(MHCII,CD80,CD83,CD11c)。单纯树突状细胞组的细胞中度表达MHCⅡ类分子,低水平表达共刺激分子,刺激T细胞增殖的能力较弱;磷酸酯多糖-树突状细胞组细胞高水平表达MHCII类分子和共刺激分子。结论:实验所采用的树突状细胞体外原代培养的方法能在体外培养出大量的未成熟树突状细胞,具有典型树突状细胞的形态特征及较高的纯度。

主 题 词：树突状细胞 骨髓 细胞培养 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100101[100101] 10[医学] 

D　O　I：10.3321/j.issn:1673-8225.2008.53.029

馆 藏 号：203271233...