鸭甲肝病毒基因A型和C型双重RT-PCR检测方法的建立

作     者：黄秋雪 汤承 聂培婷 岳华 HUANG Qiu-xue;TANG Cheng;NIE Pei-ting;YUE Hua

作者机构：西南民族大学生命科学与技术学院四川成都610041 动物医学四川省高等院校重点建设实验室四川成都610041 

基　　金：四川省科技条件平台建设项目--四川省兽医微生物资源整理及标准化 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2012年第34卷第2期

页      码：120-123页

摘      要：为建立同时检测基因A型和C型鸭甲肝病毒(DHAV-A,DHAV-C)的双重RT-PCR方法,本实验根据GenBank中DHAV-A和DHAV-C全基因组序列,针对DHAV-A的3C、3D和DHAV-C的2C区域分别设计了2对引物,通过对反应体系和反应条件的优化及特异性、灵敏度评价,建立了检测DHAV-A和DHAV-C的双重RT-PCR方法。该方法能够分别从DHAV-A、DHAV-C阳性样本中扩增出DHAV-A(259 bp)和DHAV-C(194 bp)的特异片段,而不与其它被检的无关病原发生非特异反应;对DHAV-A和DHAV-C的最低检出限分别为4.98×104拷贝/μL、1.68×104拷贝/μL;对2009年8月至2011年7月送检病料检出DHAV-A和DHAV-C的阳性率分别为20%(14/70)、70%(49/70);随机抽取的DHAV-C PCR阳性样本的病毒分离结果与双重RT-PCR检测结果的符合率为100%(16/16)。本研究结果显示,建立的双重RT-PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可用于临床DHAV的快速鉴别诊断。

主 题 词：鸭甲肝炎病毒 基因A型 基因C型 双重RT-PCR 鉴别诊断 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0589.2012.02.10

馆 藏 号：203272732...