SOCS1沉默的树突状细胞疫苗在喉癌治疗中的实验研究

作     者：远洋 王雪峰 张扬 王家玉 栾宁 

作者机构：潍坊医学院附属医院耳鼻咽喉科山东潍坊261031 辽宁医学院附属第一医院耳鼻咽喉科 北医三院普外科 哈尔滨市第一医院耳鼻咽喉科 

基　　金：辽宁省自然基金项目(No:20082180) 

出 版 物：《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 (Journal of Clinical Otorhinolaryngology Head And Neck Surgery)

年 卷 期：2012年第26卷第4期

页      码：169-173页

摘      要：目的:研究SOCS1沉默的树突状细胞(DC)疫苗特异性抗肿瘤作用机制,并探讨RNAi技术在喉癌基因治疗中的应用前景,为DC的临床应用提供新思路。方法:以细胞因子GM-CSF、IL-4和TNF-α体外诱导扩增外周血单核细胞来源的DC,倒置显微镜下观察DC形态特征;构建RNAi载体转染DC,Western blot检测SOCS1的表达情况,筛选抑制SOCS1表达的有效靶序列;流式细胞术检测DC表面分子CD83、CD86和HLA-DR的表达;ELISA法分析上清中IFN-γ的含量;MTT法评估DC刺激T细胞增殖的能力及诱导细胞毒性T细胞(CTL)的杀伤活性。结果:DC体外诱导培养成功;设计的RNAi载体经测序验证无误。干扰序列5可显著下调SOCS1表达水平;SOCS1沉默联合喉癌Hep-2抗原致敏的DC可显著上调表面分子标志CD83(85.61±0.96)%、CD86(96.86±1.20)%和HLA-DR(98.02±0.94)%的表达;该组DC能有效刺激T细胞增殖,增加IFN-γ的分泌量,最终增强CTL的特异性杀伤作用,效靶比为50∶1时其杀伤活性与对照组之间的差异有统计学意义(P<0.01)。结论:SOCS1沉默并负载喉癌Hep-2抗原的DC疫苗可以产生高效而特异性的抗喉癌免疫应答。

主 题 词：细胞因子信号转导抑制因子1 RNA干扰 DC疫苗 喉肿瘤 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.13201/j.issn.1001-1781.2012.04.006

馆 藏 号：203272743...