颅缝早闭症相关实验荧光定量PCR内参基因的选择研究

作     者：杨娴娴 Jodie T Hatfield Susan J Hinze 穆雄铮 Peter J Anderson Barry C Powell YANG Xianxian;Jodie T Hatfield;Susan J Hinze;MU Xiongzheng;Peter J Anderson;Barry C Powell

作者机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科上海市200011 澳大利亚颅颌面外科中心 阿德莱德妇女儿童健康研究中心 复旦大学医学院附属华山医院整形外科上海市200040 

基　　金：国家自然科学基金(81171835) 上海市科委非政府间国际合作项目(10410701300) 

出 版 物：《组织工程与重建外科杂志》 (Journal of Tissue Engineering and Reconstructive Surgery)

年 卷 期：2012年第8卷第3期

页      码：140-145页

摘      要：目的探讨用于颅缝早闭症相关实验的荧光定量PCR的最佳内参基因。方法应用与颅骨成骨、颅缝闭合相关的3组实验标本,分别为:Fgfr2cC342Y/+Crouzon综合征小鼠颅缝组织、颅缝早闭患者体外培养颅缝原代细胞和体外培养的小鼠Kusa 4b 10成骨细胞株。以常用的候选管家基因作为研究对象,利用geNorm软件对RT-qPCR结果进行比较分析,以筛选出在不同组织细胞中表达最为稳定的管家基因作为内参。结果Fgfr2cC342Y/+小鼠颅缝组织,Cyc1-Gapdh-Canx为最佳组合;颅缝早闭症患者体外培养颅缝原代细胞,18S rRNA和ATP5B为最佳组合;体外培养的小鼠Kusa 4b10成骨细胞株,18S rRNA和Canx为最佳组合。选择不同内参基因对目的基因RT-qPCR的结果影响显著。结论在设计RT-qPCR实验之前,应针对所选择的标本类型与种类进行管家基因稳定性分析,以增加结果的可信度。

主 题 词：颅缝早闭症荧光定量聚合酶链反应geNorm分析 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-0364.2012.03.005

馆 藏 号：203272927...