基于聚丙烯酰胺凝胶电泳的棉花EcoTILLING技术体系创建

作     者：邓康胜 吕远大 陶涛 田亮亮 郭旺珍 周宝良 张天真 DENG Kang-sheng;L(U) Yuan-da;TAO Tao;TIAN Liang-liang;GUO Wang-zhen;ZHOU Bao-liang;ZHANG Tian-zhen

作者机构：南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室江苏南京210095 

基　　金：国家自然科学基金项目(30971824) 

出 版 物：《南京农业大学学报》 (Journal of Nanjing Agricultural University)

年 卷 期：2012年第35卷第4期

页      码：1-7页

摘      要：以棉花纤维发育相关基因GhSUS1为目标基因,从EcoTILLING技术中常用的关键酶CELⅠ的提取、活性检测、目标基因引物设计及酶切等方面入手,开展了棉花EcoTILLING技术体系的创建研究。结果表明:所提取的CELⅠ活性高,稳定性好。在42℃、酶切体系为8μL PCR扩增产物中加入2μL粗酶液,与缓冲液等量混合,酶切45 min,能有效地对单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)所在的异源双链错配位点进行酶切。对棉花GhSUS1基因设计A和D染色体亚组特异性引物进行等位基因的多态性分析,结果表明:EcoTILLING结果与测序结果一致,说明建立的基于PAGE的Eco-TILLING技术体系稳定可靠,可用于棉花复等位基因发掘研究。

主 题 词：棉花 EcoTILLING 单核苷酸多态性 CELⅠ酶 

学科分类：09[农学] 0901[农学-植物生产类] 

核心收录：

馆 藏 号：203272944...