恶性疟原虫海南株STARP基因真核表达重组质粒的构建及基因结构分析

作     者：单志新 余新炳 马长玲 李学荣 吴忠道 方建民 

作者机构：中山医科大学寄生虫学教研室 

基　　金：中山医科大学"2 11"重点学科建设课题资金! (No 9816 9) 广东省自然科学资金 !(No 980 0 89) 教育部博士点基金! (博教 93-186 ) 

出 版 物：《中国人兽共患病杂志》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期：2001年第17卷第3期

页      码：25-30页

摘      要：目的　构建恶性疟原虫海南 (FCC1/HN)株STARP基因真核表达重组质粒pcDNA3-STARP ;分析STARP基因结构 ,并了解FCC1/HN株与其它分离株STARP基因序列的差异。方法　根据STARP基因已知序列设计合成两对引物 ,用PCR技术从FCC1/HN株基因组DNA中扩增两个部分序列重叠的STARP基因片段 ;将两基因片段分别双酶切后定向克隆入真核表达载体 pcDNA3 ,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞。酶切 ,PCR扩增鉴定筛选重组质粒阳性克隆 ;用双脱氧链末端终止法测序 ,应用软件辅助分析基因结构及进行同源性比较。结果　分别PCR扩增获得 10 78bp ,10 92bp的两个STARP基因片段 ;经双酶切及PCR鉴定表明获得正确重组质粒 ;恶性疟原虫FCC1/HN株与T9/ 96株STARP基因核苷酸序列同源性为 92 .2 % ;推测编码氨基酸序列同源性为 90 .9% ;在STARP蛋白中部重复区推测有多个明显的抗原表位区段。结论　从FCC1/HN株恶性疟原虫基因组DNA中获取STARP基因 ,并成功构建真核表达重组质粒pcDNA3-STARP ;FCC1/HN株与其它分离株STARP基因有高度的同源性。

主 题 词：恶性疟原虫 子孢子苏氨酸 重组质粒 天冬酰胺富集蛋白 聚合酶链反应 克隆 基因测序 STARP基因 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100201[100201] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1002-2694.2001.03.008

馆 藏 号：203273786...