鼠伤寒沙门菌spvB基因缺陷变异株的制备及其抗酸能力检测

作     者：吴春雪 陈强 李红 余晓君 朱春晖 李岚 何美娟 刘晓艳 

作者机构：江西省儿童医院内科南昌330006 江西省儿童医院中心实验室南昌330006 江西省儿童医院检验科南昌330006 南昌大学研究生院医学部南昌330006 

基　　金：江西省自然科学基金资助项目(No.20132BAB205036) 

出 版 物：《华中科技大学学报（医学版）》 (Acta Medicinae Universitatis Scientiae et Technologiae Huazhong)

年 卷 期：2014年第43卷第4期

页      码：399-404页

摘      要：目的为深入研究鼠伤寒沙门菌毒力基因spvB的功能,制备鼠伤寒沙门菌spvB基因完全缺陷变异株,观察spvB基因缺陷株在体外酸性环境中的生存能力。方法根据鼠伤寒沙门菌spvB基因序列,设计PCR特异性引物,制备spvB基因缺陷性同源性核苷酸片段,导入自杀质粒pCVD442后再导入鼠伤寒沙门菌野生株,进行同源重组,用PCR方法观察重组现象,将完全重组的菌株作为spvB基因的缺陷变异株,并通过核苷酸序列分析加以确定。绘制生长曲线,对比spvB基因缺陷变异株与野生株在酸性条件下的生存情况。结果 PCR及序列分析证实,缺陷变异株的spvB基因缺失1 749bp。酸性条件下培养1h及2h后,野生株的活菌数高于spvB基因缺陷株,差异有统计学意义(P<0.05);且野生株在酸性环境中的生存率明显高于缺陷株,野生株在1h及2h后的生存率分别为85.6%、74.9%,缺失株分别为68.0%、42.3%。结论成功构建鼠伤寒沙门菌spvB基因缺陷变异株,并发现在酸性条件下其生存能力明显降低,为进一步研究其在鼠伤寒沙门菌中的功能奠定了基础。

主 题 词：鼠伤寒沙门菌 spvB 基因缺陷变异 同源重组 生长曲线 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3870/j.issn.1672-0741.2014.04.007

馆 藏 号：203274023...