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基于CODEHOP的欧李钙调蛋白基因片段的克隆

基于CODEHOP的欧李钙调蛋白基因片段的克隆

作     者:邬晓勇 孙雁霞 梁勇 陈月星 苟小军 WU Xiao-yong SUN Yan-xia LIANG Yong CHEN Yue-xing GOU Xiao-jun

作者机构:成都大学药学与生物工程学院四川成都610106 

基  金:教育部地方高校国家级大学生创新创业训练计划项目(201411079017) 成都大学大学生创新试验计划(CDUCX2015108) 

出 版 物:《烟台大学学报(自然科学与工程版)》 (Journal of Yantai University(Natural Science and Engineering Edition))

年 卷 期:2017年第30卷第4期

页      码:292-300页

摘      要:为克隆欧李钙调蛋白基因序列,本研究采用CODEHOP方法设计了一对简并引物,F1:5 -GGCTGACCAACTGACCga(c/t)ga(c/t)ca(a/g)at-3 ;F2:5 -CACGTCAGCCTCTCTGatcat(c/t)tc(a/g)tc-3 ;并采用传统简并引物设计方法设计了简并引物N1:5’-AAATGGC(A/C/G)GATCAGCT(A/C/T)AC-3’;N2:5:’-CACTT(A/G)GCCATCATGAC(C/T)TT-3’.从欧李的幼苗组织中成功克隆出了钙调蛋白基因片段,并第一次完成了对该序列的测序.通过利用NCBI的Blast进行分析等方法证实了该序列与其他植物的钙调蛋白序列具有高度的同源性,该序列与梅花、桃、甜樱桃的钙调蛋白序列同源性都在90%以上.研究证明CODEHOP软件相比传统的设计简并引物的方法具有可信性和高效性,并且钙调蛋白目的基因的成功克隆对钙调蛋白以及欧李高钙特性的研究提供了基础数据.

主 题 词:欧李 钙调蛋白基因 简并引物 一致简并杂合寡核苷酸引物(CODEHOP) 克隆 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 071001[071001] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D O I:10.13951/j.cnki.37-1213/n.2017.04.005

馆 藏 号:203274814...

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