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液滴数字聚合酶链式反应芯片及其在致病菌检测中的应用

液滴数字聚合酶链式反应芯片及其在致病菌检测中的应用

作     者:邓雪蕾 张苑怡 袁浩钧 刘松生 陈莹莹 郜晚蕾 周洪波 贾春平 赵建龙 卞晓军 DENG Xue-lei;ZHANG Yuan-yi;YUAN Hao-jun;LIU Song-sheng;CHEN Ying-ying;GAO Wan-lei;ZHOU Hong-bo;JIA Chun-ping;ZHAO Jian-long;BIAN Xiao-jun

作者机构:上海海洋大学食品学院上海201306 传感技术国家重点实验室中国科学院上海微系统与信息技术研究所上海200050 农业部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室(上海)上海201306 上海海洋大学食品学院食品热加工工程技术研究中心上海201306 

基  金:国家自然科学基金(21405167 81472751 61271162) 上海晨光计划(15CG54) 国家科技重大专项(2017ZX10302201-005-006) 

出 版 物:《分析测试学报》 (Journal of Instrumental Analysis)

年 卷 期:2017年第36卷第10期

页      码:1191-1196页

摘      要:设计与制作了一种基于聚二甲基硅氧烷-玻璃(PDMS-Glass)的多功能集成式液滴数字聚合酶链式反应(ddPCR)芯片,该芯片由产生液滴的PDMS模块和收集液滴的玻璃腔体模块组成。PDMS模块采用双通道的T形结构设计,液滴产生速度快且通量高,在30 min内可生成2×10~6个直径约为20μm的微液滴。玻璃腔体模块中存储的液滴在整个实验过程中无需转移,可直接在原位PCR仪上进行扩增,每个液滴均是一个微反应器,经过多次热循环后,液滴仍能保持良好的稳定性。选用副溶血性弧菌(VP)作为食源性致病菌的研究模型,考察了ddPCR芯片对其基因组DNA的绝对定量能力,结果表明,该ddPCR芯片对VP基因组DNA绝对定量的线性范围宽,可跨越5个数量级(10~1~10~6 copies/μL),定量结果与DNA理论参考浓度间有很好的相关性。

主 题 词:数字PCR 液滴微流控芯片 致病菌 副溶血性弧菌 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 071010[071010] 081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 070302[070302] 0703[理学-化学类] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1004-4957.2017.10.004

馆 藏 号:203277870...

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