CRISPR/Cas9系统介导的地衣芽孢杆菌基因敲除

作     者：李由然 顾正华 张梁 丁重阳 石贵阳 Li Youran;Gu Zhenghua;Zhang Liang;Ding Zhongyang;Shi Guiyang

作者机构：江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室无锡214122 

基　　金：国家自然科学基金青年基金项目(31401674) 十三五国家重点研发计划(2016YFD0401404) 江南大学自主重点项目(JUSRP51503)共同资助 

出 版 物：《基因组学与应用生物学》 (Genomics and Applied Biology)

年 卷 期：2017年第36卷第10期

页      码：4188-4196页

摘      要：地衣芽孢杆菌是具有广泛应用的重要工业微生物,迄今为止这一菌株的基因编辑工具仍十分有限。CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)/Cas9系统已在许多物种中成功应用于基因编辑,然而地衣芽孢杆菌极低的转化和重组效率为CRISPR/Cas9系统在这一宿主中的应用带来障碍。本研究构建了诱导型表达Cas9蛋白的重组质粒,成功实现了CRISPR/Cas9系统介导的地衣芽孢杆菌淀粉酶编码基因amy L的敲除。结果显示,所设计的3个sg RNA均能实现目的基因的有效编辑,基因敲除的成功率分别为58%、39%和37%。淀粉酶基因敲除的重组大肠杆菌生长无显著影响,淀粉酶活力为原始菌的0.86%。以上成果为研究地衣芽孢杆菌的基因功能及通过菌种改造提升这一工业微生物的发酵性能提供了新型、有效的基因编辑工具。

主 题 词：地衣芽孢杆菌 CRISPR/Cas9 基因敲除 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.13417/j.gab.036.004188

馆 藏 号：203277879...