口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒二重RT-LAMP鉴别检测方法的建立

作     者：范晴 谢芝勋 谢志勤 庞耀珊 邓显文 谢丽基 黄莉 FAN Qing XIE Zhi-xun XIE Zhi-qin PANG Yao-shan DENG Xian-wen XIE Li-ji HUANG LI

作者机构：广西兽医研究所广西动物疫病病原生物学与诊断重点试验室广西南宁530001 

基　　金：广西自然科学基金资助项目(2014GXNSFBA118105) 广西水产畜牧兽医局科技推广应用基金资助项目(桂渔牧科201452002) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2017年第37卷第10期

页      码：1829-1834页

摘      要：LAMP技术是一种快速新型的核酸检测技术,该技术利用4条引物在恒温下扩增目的 DNA,特异性好敏感性高。本试验旨在建立一种能同时鉴别诊断FMDV和VSV的二重RT-LAMP检测方法。根据口蹄疫病毒(FMDV)3D基因和水泡性口炎病毒(VSV)N基因的保守序列,设计了2套特异性引物,在每套引物的内引物中插入酶切位置EcoRⅠ,对反应条件进行了优化,建立了恒温快速的检测方法。结果显示:该方法特异性好,能检测到口蹄疫病毒的A,O,Asia1亚型和水泡性口炎的NJ和IND亚型,并与其他对照牛病原体不发生交叉反应;敏感性高,最低能够检测个100个FMDV病毒RNA和100个VSV病毒RNA;干扰性小,能同时检测两个模板的不同浓度组合。本试验建立的口蹄疫和水泡性口炎二重RT-LAMP方法具有简便、快速、特异、敏感等优点,可用于FMDV和VSV的临床检测和流行病学调查。

主 题 词：口蹄疫病毒 水泡性口炎病毒 二重RT-LAMP 酶切 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2017.10.03

馆 藏 号：203277904...