基因工程实验教学中PCR反应条件的正交优化

作     者：刘顺枝 邓剑锋 田长恩 王小兰 胡位荣 

作者机构：广州大学生命科学学院广东广州510006 

基　　金：广东省高等院校学科建设专项资金项目(2008-342) 广州大学2012年度教育教学研究项目资助 

出 版 物：《安徽农业科学》 (Journal of Anhui Agricultural Sciences)

年 卷 期：2012年第40卷第24期

页      码：12276-12278页

摘      要：采用碱裂解法提取大肠杆菌的质粒DNA,检测提取到的DNA浓度和纯度,并以提取的DNA作为PCR反应体系中的模板,采用搜索性正交设计试验法探求PCR反应体系中4个因素(dNTPs、DNA模板、引物和Taq酶)在5个水平上的最适用量,在此基础上,进一步设计细调性正交试验筛选PCR反应的最适条件。结果表明,在20μl PCR反应体系中,DNA模板5 ng/μl,dNTPs 0.25 mmol/L,引物0.6μmol/L,Taq酶1.5 U/μl,Mg2+浓度1.5 mmol/L时,PCR的效果最好。

主 题 词：大肠杆菌 PCR反应 正交设计 条件优化 实验教学 

学科分类：09[农学] 0903[农学-动物生产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.0517-6611.2012.24.124

馆 藏 号：203278433...