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外泌体对SH—SY5Y细胞缺氧再灌注损伤的影响

外泌体对SH—SY5Y细胞缺氧再灌注损伤的影响

作     者:柴毅 范阳华 纪晨星 吕世刚 吴淼经 叶敏华 肖兵 徐斌 祝新根 Chai Yi Fan Yanghua Ji Chenxing Lyu Shigang Wu Miaojing Ye Minhua Xiao Bing Xu Bin Zhu Xingen

作者机构:南昌大学第二附属医院神经外科南昌330006 

基  金:国家自然科学基金(81660420) 江西省优势科技创新团队建设计划(20152BCB24009) 江西省对外科技合作计划20151BDH80009 

出 版 物:《中华神经医学杂志》 (Chinese Journal of Neuromedicine)

年 卷 期:2017年第16卷第10期

页      码:1009-1015页

摘      要:目的探讨外泌体对人神经母细胞瘤细胞株(SH—SY5Y)缺氧再灌注损伤的影响。方法构建人脐静脉血管内皮细胞(mJVEC)缺氧再灌注损伤(HUVECI/R1模型.从中提取外泌体并予以鉴定。构建***5Y细胞缺氧再灌注损伤(***5YI/R)模型并分为2组.其中外泌体组于再灌注同时予以外泌体刺激,对照组于再灌注同时予以无外泌体血清培养基培养。采用CCK8法检测2组细胞培养24h、48h、72h时细胞活力,采用Hochest33258染色检测细胞凋亡情况,采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况及细胞周期,采用划痕实验、Transwell侵袭实验分别检测细胞迁移能力和侵袭能力,采用***、Westernblotting检测细胞中Caspase-3、Bax、Bcl-2mRNA和蛋白表达。结果与对照组比较,外泌体组细胞培养48h、72h时细胞活力明显提高(48h:0.70±0.05vs0.94±0.08;72h:0.83±0.05vs1.02±0.06),G0/G1期细胞比例明显降低(71.26%±5.24%vs566.87%±4.23%).S期细胞比例明显增高(14.39%±4.11%vs20.54%±3.46%),相对划痕损伤面积明显减少(0.61±0.07vs50.52±0.10),穿膜细胞数量明显增多(44.00±6.56vs70.67±6.11),细胞中Bax、Caspase-3mRNA表达水平明显降低、Bcl-2mRNA表达水平明显增高,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论HUVECI/R模型来源外泌体可在SH-SY5Y细胞缺氧再灌注损伤后发挥神经保护作用。

主 题 词:外泌体 脑卒中 缺血再灌注损伤 神经保护 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100204[100204] 10[医学] 

D O I:10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2017.10.008

馆 藏 号:203278434...

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