鲁氏耶尔森菌qPCR快速检测方法的建立和应用

作     者：张枭 李绍戊 王荻 曹永生 卢彤岩 ZHANG Xiao;LI Shaowu;WANG Di;CAO Yongsheng;LU Tongyan

作者机构：中国水产科学研究院黑龙江水产研究所黑龙江哈尔滨150070 南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 

基　　金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资助项目(HSY201503) 新疆维吾尔自治区区域协同创新专项(2016E02052) 

出 版 物：《中国水产科学》 (Journal of Fishery Sciences of China)

年 卷 期：2017年第24卷第6期

页      码：1254-1260页

摘      要：鲁氏耶尔森菌(Yersinia ruckeri)是导致虹鳟(Oncorhynchus mykiss)肠炎红嘴病的病原。本研究以鲁氏耶尔森菌毒力因子rup A基因为靶标设计1对特异性引物,以含有rup A基因部分序列的重组质粒为标准品构建标准曲线,优化建立检测鲁氏耶尔森菌的SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法,并对腹腔注射鲁氏耶尔森菌菌悬液的虹鳟肝、肾、脾、血液样品进行检测。结果显示,设计的引物具有良好的种间特异性,标准曲线线性方程为y=–3.3766x+40.012(R^2=0.9958);最低检测限为57 copy/μL,较常规PCR的灵敏度高出约100倍。应用检测结果表明,本方法可准确检测被鲁氏耶尔森菌感染的虹鳟样品。研究表明,所建立的qPCR方法具有特异、灵敏、快速、定量的优点,可用于快速诊断虹鳟肠炎红嘴病早期病症及定量检测鲁氏耶尔森菌。

主 题 词：鲁氏耶尔森菌 rupA基因 实时荧光定量PCR 肠炎红嘴病 鲑科 虹鳟 

学科分类：0906[农学-水产类] 09[农学] 

核心收录：

D　O　I：10.3724/SP.J.1118.2017.17001

馆 藏 号：203278469...