黄颡鱼源维氏气单胞菌Aha和gyrB基因双重PCR检测方法的建立

作     者：朱成科 刘桂嘉 张争世 李明朔 雷骆 王建 邓星星 周朝伟 郑宗林 ZHU Cheng-ke;LIU Gui-jia;ZHANG Zheng-shi;LI Ming-shuo;LEI Luo;WANG Jian;DENG Xing-xing;ZHOU Chao-wei;ZHENG Zong-lin

作者机构：西南大学荣昌校区水产系淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室/水产科学重庆市市级重点实验室重庆402460 西南大学荣昌校区动物医学系重庆402460 

基　　金：重庆市生态渔业技术体系建设专项资金(40800115 40800216) 西南大学荣昌校区青年基金项目(20700913) 中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(XDJK2012C095) 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2017年第39卷第10期

页      码：810-814页

摘      要：为建立一种快速、准确检测黄颡鱼源维氏气单胞菌(***)的方法,本研究根据***菌株RC110724黏附素基因(Aha)和促旋酶B亚单位基因(gyrB)序列设计引物,经条件优化建立了***的双重PCR检测方法。结果显示该方法可以同时扩增出*** 419 bp和745 bp两条特异性的片段,而对嗜水气单胞菌、迟缓爱德华菌、副溶血性弧菌、麦氏弧菌、荧光假单胞菌、金黄色葡萄球菌、柱状黄杆菌、肺炎克雷伯氏菌、无乳链球菌、舒伯特气单胞菌扩增结果为阴性;该方法对***标准株ATCC35624和RC110724基因组DNA和菌体检测下限分别为6.6×10^(-3)ng/μL和3.2×10~2cfu/mL。利用建立的双重PCR方法对30份临床样品进行检测,结果与细菌传统分离鉴定符合率为100%。同时,双重PCR可以检出菌株RC110724人工感染的黄颡鱼肝、脾和肾组织中的细菌DNA,对肝和脾脏组织的样品检测效果最好。本研究建立的双重PCR检测方法特异性好,具有较高的检测灵敏性,可用于黄颡鱼等***感染病例的快速诊断和流行病学监测。

主 题 词：维氏气单胞菌 Aha基因 gyr B基因 双重PCR 检测 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0425.201704002

馆 藏 号：203278482...