抗PD-L1CAR基因的构建及CAR-T的功能活性研究

作     者：白静 张洁雯 施炜星 陈健 吕正兵 BAI Jing;ZHANG Jiewen;SHI Weixing;CHEN Jian;L(U) Zhengbing

作者机构：浙江理工大学生命科学学院杭州310018 浙江理工大学浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室杭州310018 

基　　金：国家高技术研究发展计划项目(2012ZX09102301-009) 浙江省自然科学基金项目(13H090015) 

出 版 物：《浙江理工大学学报（自然科学版）》 (Journal of Zhejiang Sci-Tech University(Natural Sciences))

年 卷 期：2017年第37卷第6期

页      码：901-908页

摘      要：鉴于嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cells,CAR-T)疗法应用于肿瘤治疗的临床试验已取得很大突破,设计了程序性死亡配体-1(programmed death ligand-1,PD-L1)特异性CAR-T细胞以体外杀伤肺癌细胞。通过克隆表达PD-L1_((73-739)),并纯化PD-L1蛋白以免疫BALB/c小鼠制备获得PD-L1单克隆抗体;克隆PD-L1单克隆抗体单链可变区片段,与CD28、4-1BB、CD3-ζ链的基因体外融合构建第三代CAR基因,并克隆于慢病毒载体pCDH-CMV-EF1-copGFP上,包装成慢病毒。该慢病毒感染CD^(8+)T细胞,扩增5d,测定CAR的表达,表达率可达到22%以上。PD-L1靶向的肿瘤细胞杀伤作用分析显示,抗PD-L1CAR-T细胞有一定的体外杀伤活性。

主 题 词：肺癌 程序性死亡配体-1 嵌合抗原受体 单克隆抗体 过继细胞治疗 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071009[071009] 09[农学] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-3851.2017.11.023

馆 藏 号：203278539...