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串联鹿茸多肽基因在单一蛋白生产系统中的表达

串联鹿茸多肽基因在单一蛋白生产系统中的表达

作     者:唐小雨 潘宇铭 许文豪 郑红鹤 刘畅 王程 TANG Xiaoyu;PAN Yuming;XU Wenhao;ZHENG Honghe;LIU Chang;WANG Cheng

作者机构:吉林医药学院基础医学院吉林吉林132013 

基  金:吉林省科技厅自然科学基金项目(20150101131JC) 吉林市科技创新发展计划项目(20166030) 吉林医药学院大学生创新创业训练计划项目(2016c309) 

出 版 物:《吉林医药学院学报》 (Journal of Jilin Medical University)

年 卷 期:2017年第38卷第6期

页      码:411-414页

摘      要:目的利用单一蛋白生产(SPP)系统可溶性表达串联鹿茸多肽(AP)。方法设计并合成由凝血酶Ⅹa序列间隔的5倍串联AP基因(5×AP),并将其克隆至冷休克表达载体中构建pColdⅡ(sp-4)-5×AP质粒,然后与pMazF质粒共转化入大肠杆菌*** BL21(DE3)中建立SPP系统,表达后经凝血酶Ⅹa水解获得AP。结果 5倍串联AP基因的碱基数为570 bp,在30℃下利用1 mol/L IPTG诱导表达的串联AP的分子量为18 500,水解后获得的AP的分子量为3700。结论利用SPP系统可成功表达纯度较高的串联AP,并可被凝血酶Ⅹa水解获得AP,为进一步研究基因工程方法制备AP的生物学性质奠定基础。

主 题 词:鹿茸多肽 串联重复 单一蛋白生产 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D O I:10.13845/j.cnki.issn1673-2995.2017.06.004

馆 藏 号:203278560...

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