牛病毒性腹泻病毒RT-PCR方法的建立及应用

作     者：王吉 付瑞 李晓波 王淑菁 王莎莎 李威 秦骁 巩薇 岳秉飞 贺争鸣 WANG Ji;FU Rui;LI Xiao bo;WANG Shu jing;WANG Sha sha;LI Wei;QIN Xiao;GONG Wei;YUE Bing fei;HE Zheng ming

作者机构：中国食品药品检定研究院国家实验动物微生物遗传检测中心北京100050 

基　　金：中国食品药品检定研究院学科带头人培养基金项目(编号:2015X5) 

出 版 物：《中国比较医学杂志》 (Chinese Journal of Comparative Medicine)

年 卷 期：2017年第27卷第11期

页      码：68-74页

摘      要：目的建立用于牛源样本中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)双重RT-PCR检测方法。方法选择已发表的BVDV 1型和BVDV 2型包含5’UTR区高保守区域基因作为靶基因,分别设计合成引物,建立双重BVDV RT-PCR方法,并对方法的特异性、敏感性、稳定性等进行方法学评价。同时用建立的RT-PCR方法检测了小牛血清、小牛血清去蛋白提取液、脾多肽注射液等41批次牛源性样本和64份牛血浆样本。牛源样本和64份牛临床样本。结果建立的BVDV RT-PCR检测方法与牛副流感病毒III型(BPIV3)、猪瘟病毒(CSFV)、乙型脑炎病毒(JEV)均无交叉反应;检测BVDV 1型和BVDV 2型DNA模板最低浓度分别为每微升8.87×10~2拷贝和6.31×10~2拷贝,BVDV 1型和2型c DNA在-30℃冰箱放置12个月仍可检测出目的条带。应用建立的BVDV RT-PCR方法检测41批次牛源样本和64份牛血浆样本,核酸阳性率分别为14.6%和29.7%。结论建立的BVDV RT-PCR检测方法具有快速、特异、敏感及稳定的特点,可用于牛源样本携带BVDV核酸的检测。

主 题 词：牛病毒性腹泻病毒 RT-PCR 牛源样本 

学科分类：10[医学] 

馆 藏 号：203278594...