猴免疫缺陷病毒实时荧光环介导等温扩增快速检测方法的建立

作     者：刘助红 王静 黄碧洪 尹雪琴 张钰 郭鹏举 黄韧 LIU Zhu-hong;WANG Jing;HUANG Bi-hong;YIN Xue-qin;ZHANG Yu;GUO Peng-ju;HUANG Ren

作者机构：广东省实验动物监测所广东省实验动物重点实验室广州510663 

基　　金：广东省科技计划项目(2016A040403059 2014A040401035 2014B070706006) 国家科技支撑计划项目(2015BA I07B01) 

出 版 物：《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期：2017年第25卷第5期

页      码：37-41页

摘      要：以猴免疫缺陷病毒(Simian immunodeficiency virus,SIV)的核心蛋白Gag区域的部分保守基因序列为检测靶标,通过软件设计内、外引物和环引物,借助恒温荧光扩增仪建立SIV实时荧光环介导等温扩增快速检测方法(real-time loop-mediated isothermal amplification,Realamp),根据有无"S"型扩增曲线判断检测结果。Realamp方法对含有猴免疫缺陷病毒目标片段的质粒标准品的检测灵敏度为300 copies/μL,对猴类的其他常见病原如猴D型逆转录病毒、猴T淋巴细胞趋向性病毒、猴B病毒等无非特异性扩增。通过33份临床样本的检测,Realamp检出的阳性2例,qPCR检出的阳性率为1例,两种检测方法的符合率为97%。本研究建立的Realamp检测技术所需设备简单、反应效率快、检测灵敏度高和特异性强,可用于偏远地区猴养殖单位相关病原的检测。

主 题 词：猴免疫缺陷病毒 实时荧光环介导等温扩增技术 检测 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203278625...