TRAF1基因干扰质粒的构建及其对胃癌细胞生物学功能的影响

作     者：王芬 杨燕 冯茜 步光奎 黄利华 闾宏伟 郭勤 徐灿霞 沈守荣 WANG Fen;YANG Yan;FENG Qian;BU Guangkui;HUANG Lihua;L(U) Hongwei;GUO Qin;XU Canxia;SHEN Shourong

作者机构：中南大学湘雅三医院消化内科长沙410013 湘潭市中心医院消化内科湖南湘潭411100 

基　　金：湖南省自然科学基金(10JJ5035) 

出 版 物：《中南大学学报（医学版）》 (Journal of Central South University ：Medical Science)

年 卷 期：2012年第37卷第9期

页      码：876-882页

摘      要：目的：构建TRAF1基因干扰重组质粒及建立TRAF1基因干扰瞬时转染胃癌细胞模型，然后通过干扰目标胃癌细胞中的TRAF1基因来检测TRAF1对胃癌细胞的生物学功能的影响。方法：首先通过rea1—tin1ePCR和Western印迹验证TRAF1在胃癌细胞系BGC823，SGC7901，MGC803中的表达，筛选出TRAF1表达量最高的一株细胞作为干扰转染的目标细胞；设计及构建3个TRAF1的shRNA表达载体***1～3，将其分别转染至目标胃癌细胞系中，应用***和Western印迹筛选出干扰效率最强的shRNA，最后通过MTF及流式细胞术检测TRAF1对胃癌细胞凋亡能力的影响，通过Transwe11小室迁移实验来检测对其迁移功能的影响。结果：与GES．1比较，TRAF1基因在BGC823，SGC7901，MGC803中的表达均有上调（P〈O．05），其中以BGC823表达最高；3个TRAF1shRNA对TRAF1基因均有抑制作用，以pLVX-shRNA-TRAF1-shRNA2干扰效果最强；干扰胃癌细胞BGC823中的TRAF1可使细胞生长活力减弱，凋亡明显增加，但对其迁移功能无明显影响。结论：TRAF1基因在胃癌细胞系BGC823中上调最明显；***2可成功干扰BGC823中TRAF1的表达；TRAF1可抑制BGC823细胞的凋亡。

主 题 词：TRAF1 干扰 胃癌细胞系 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1672-7347.2012.09.003

馆 藏 号：203279231...