猪圆环病毒2型纳米PCR检测方法的建立及初步应用

作     者：刘志科 曹军军 张洁 杨宁宁 徐明国 吴文星 陈创夫 

作者机构：石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 石河子大学生命科学学院新疆石河子832003 

基　　金：西部地区高发人兽共患传染性疾病防治项目(2013-179) 

出 版 物：《现代畜牧兽医》 (Modern Journal of Animal Husbandry and Veterinary Medicine)

年 卷 期：2017年第11期

页      码：1-6页

摘      要：建立一种高效、快捷、灵敏的猪圆环病毒2型(PCV-2)的检测方法,本研究根据PCV-2 ORF2基因的保守核苷酸区域设计一对特异性引物,建立了一种用于检测PCV-2的纳米PCR方法,对其反应条件进行优化,并用重组质粒PET28a-ORF2,以及PCV-2(DNA)、猪流行性腹泻病毒(cDNA)、猪瘟病毒(cDNA)和猪细小病毒(cDNA)分别作为模板,检测了该方法的灵敏性及特异性,同时对采集的临床样品进行检测。结果表明,该纳米PCR方法可以扩增出大小为636 bp的特异性片段;最佳的退火温度为54℃,胶体金浓度为0.5 nmol/L,最低可以检出1.0×10~2拷贝/μL,其灵敏度比普通PCR检测方法高10倍以上;对采集的新疆某大型种猪场的78临床份病料进行检测,其阳性检出数量比常规PCR的检出数量高4份样品,表明PCV-2纳米PCR方法具有较高的特异性和灵敏性。本研究建立的纳米PCR方法可用于PCV-2病原学的早期检测和分子流行病学调查;同时对于低病毒的临床样品的检测也提供了一种有效的技术手段。

主 题 词：猪圆环病毒2型 ORF2基因 纳米PCR 临床样品 病原学检测 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203279570...