白木香丙二烯氧化物合酶基因的表达分析

作     者：冯莹莹 张钟秀 董先娟 刘晓 闫雅如 王金铃 王晓晖 史社坡 FENG Ying-ying;ZHANG Zhong-xiu;DONG Xian-juan;LIU Xiao;YAN Ya-ru;WANG Jin-ling;WANG Xiao-hui;SHI She-po

作者机构：北京中医药大学中药学院中药现代研究中心北京100029 中国中医科学院中药研究所北京100700 

基　　金：国家自然科学基金青年基金资助项目(81503182) 

出 版 物：《药学学报》 (Acta Pharmaceutica Sinica)

年 卷 期：2017年第52卷第12期

页      码：1962-1969页

摘      要：茉莉酸(jasmonic acid,JA)为植物防御反应的重要信号分子,其生物合成途径的关键酶是丙二烯氧化物合成酶(allene oxide synthase,AOS)。本研究以白木香(Aquilaria sinensis)为材料,设计特异引物,克隆了白木香As AOS1基因的c DNA序列,并进行氨基酸序列分析、原核表达和纯化、组织特异性分析及非生物胁迫和激素诱导表达分析。白木香As AOS1基因的开放阅读框(ORF)长1 575 bp,编码524个氨基酸,其蛋白分子质量是58.70 k Da。As AOS1蛋白包含细胞色素P450的保守区域。系统进化树显示As AOS1蛋白与甜橙(Citrus sinensis)AOS蛋白同源性较高。构建原核表达载体p ET28a-As AOS1并在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中成功表达As AOS1重组蛋白,利用Ni2+亲和色谱纯化得到可溶性As AOS1重组蛋白。荧光定量PCR结果显示As AOS1基因在茎中表达最高,根次之,叶中表达最低。盐、低温和重金属胁迫能够诱导白木香愈伤组织中As AOS1基因表达,诱导12 h表达量达到最高;激素茉莉酸甲酯、水杨酸和脱落酸诱导后,愈伤组织中As AOS1基因的表达量明显上升,而干旱胁迫和赤霉素处理对本As AOS1基因的表达量影响不大。本研究为进一步研究茉莉酸途径在白木香结香机制和植物防御反应中作用奠定基础。

主 题 词：白木香 丙二烯氧化物合酶 茉莉酸 原核表达 表达分析 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 100703[100703] 1004[医学-公共卫生预防医学类] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.16438/j.0513-4870.2017-0568

馆 藏 号：203279892...