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利用CRISPR-Cas9基因编辑技术获得水稻OsYUCCA1基因突变体

利用CRISPR-Cas9基因编辑技术获得水稻OsYUCCA1基因突变体

作     者:何先畅 黄国强 王道洋 常淑伟 张大兵 He Xianchang;Huang Guoqiang;Wang Daoyang;Chang Shuwei;Zhang Dabing

作者机构:上海交通大学生命科学技术学院上海200240 

出 版 物:《基因组学与应用生物学》 (Genomics and Applied Biology)

年 卷 期:2017年第36卷第11期

页      码:4778-4784页

摘      要:为研究植物激素生长素在模式作物水稻中的功能,我们利用CRISPR-Cas9基因编辑技术,设计水稻生长素合成基因Os YUCCA1的两个靶位点,构建Os YUCCA1基因的敲除载体。通过对Os YUCCA1基因序列分析,将合成的靶点序列插入含hsp Cas9n的载体中,再与p CAMBIA1300重组,构建基因编辑载体,通过农杆菌介导的方法转化水稻品种9522。从78棵转基因苗中鉴定得到针对Os YUCCA1的3种突变类型,包括26棵在外显子第260号碱基处插入碱基A或T两种类型纯合突变和22棵在外显子第447号碱基处插入A、444号碱基C被T替换、445号碱基G被C替换的杂合突变类型。通过分析,发现3种突变株系都存在移码现象而使氨基酸提前终止致使基因突变。本研究成功利用CRISPR-Cas9基因编辑技术敲除了水稻Os YUCCA1基因,为进一步研究Os YUCCA1基因功能提供了理论参考依据。

主 题 词:水稻 OsYUCCA1 生长素 CRISPR/Cas9 基因编辑技术 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 090102[090102] 

核心收录:

D O I:10.13417/j.gab.036.004778

馆 藏 号:203279962...

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