金槐ISSR-PCR反应体系的优化和引物筛选

作     者：唐健民 邹蓉 史艳财 舒文将 朱世缘 蒋运生 熊忠臣 

作者机构：广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所广西植物功能物质研究与利用重点实验室广西桂林541006 广西师范大学生命科学学院桂林541004 桂林医学院广西桂林541004 

基　　金：广西科技攻关项目(1598006-5-5) 广西植物功能物质研究与利用重点实验室主任基金(ZRJJ2016-20) 广西科学院基本科研业务费资助项目(2017YJJ23010) 

出 版 物：《时珍国医国药》 (Lishizhen Medicine and Materia Medica Research)

年 卷 期：2017年第28卷第11期

页      码：2747-2749页

摘      要：目的优化和建立稳定的金槐ISSR-PCR反应体系并筛选出稳定的ISSR-PCR引物。方法采用L16(45)正交设计方法,以dNTP、Tap酶、ISSR引物、Mg^(2+)浓度和模版DNA 5个影响因素进行4水平优化试验,并对反应体系进行验证;采用优化所得的最佳反应体系进行引物筛选。结果确立了金槐的最佳ISSR-PCR反应体系:即在25μl总体积反应体系中包含10×Buffer2.5μl,MgCl22.5mmol·L^(-1),ISSR引物0.6μmol·L^(-1),dNTPs0.25mmol·L^(-1),Taq酶1.0U,模板DNA约50ng。通过最佳体系进行引物筛选,获得11条适宜金槐扩增的ISSR引物。结论经过12份金槐样品的验证,证明所建立的体系稳定可靠,可用于金槐遗传多样性、指纹图谱和标记辅助育种等方面的研究。

主 题 词：金槐 ISSP-PCR 正交设计 引物筛选 

学科分类：1008[医学-中药学类] 1006[医学-中西医结合类] 100602[100602] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/i.issn.1008-0805.2017.11.065

馆 藏 号：203280224...