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猪圆环病毒3型PCR诊断方法的建立

猪圆环病毒3型PCR诊断方法的建立

作     者:郑庆礼 李春燕 林在纲 许丽惠 王全溪 ZHENG Qing-li;LI Chun-yan;LIN Zai-gang;XU Li-hui;WANG Quan-xi

作者机构:福建农林大学动物科学学院福建福州350002 

基  金:福建农林大学科学发展基金项目(KF2015094) 

出 版 物:《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期:2017年第47卷第12期

页      码:1517-1521页

摘      要:根据NCBI中PCV3的基因组序列,设计了1对特异性引物,并对PCR的反应体系和反应条件进行优化,同时进行特异性和敏感性试验,最后应用所建立的PCR方法检测了临床送检的22份病料。结果显示,建立的PCR方法的最佳反应条件为总体积25 L,退火温度56℃,模板DNA量3 L(l ng/m L),进行35个循环。该PCR能特异地扩增出目的片段,长度约为381 bp。测序结果表明,PCR扩增产物正确。该PCR反应特异性强,只能扩增PCV3阳性样品,且能扩增的最低模板量为1×10-4ng/m L。用该PCR对送检的22份病料进行PCV3检测,结果阳性率为13.6%。可见,本研究建立的PCR方法特异、敏感,可用于PCV3的快速检测。

主 题 词:猪圆环病毒3型 聚合酶链式反应 诊断方法 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D O I:10.16656/j.issn.1673-4696.2017.12.008

馆 藏 号:203280227...

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