猪链球菌荧光定量PCR检测方法的建立及临床应用

作     者：雷宇平 王仲兵 杨治平 张仲萍 王治维 胡明明 Lei Yuping;Wang Zhongbing;Yang Zhiping;Zhang Zhongping;Wang Zhiwei;Hu Mingming

作者机构：山西省动物疫病预防控制中心山西太原030027 

基　　金：山西省重点研发计划一般项目(201603D221023-3) 

出 版 物：《中国动物检疫》 (China Animal Health Inspection)

年 卷 期：2017年第34卷第12期

页      码：84-87页

摘      要：为快速诊断和检测猪链球菌病,根据GenBank中已登录的猪链球菌抗原基因保守区域序列,设计并合成特异性引物及Taqman探针,通过优化荧光定量PCR反应体系及扩增条件,构建了快速、准确检测猪链球菌的Taqman荧光定量PCR检测方法(Taqman FQ-PCR),测定了该方法的灵敏性、重复性和特异性,并对疑似猪链球菌临床感染样本进行了检测。结果显示:所建立的Taqman FQ-PCR方法检测灵敏度为1×10~2拷贝/μL;对3种不同浓度的猪链球菌重组质粒进行3次重复扩增,变异系数均小于3%,说明重复性好;特异性检测显示,只有猪链球菌样本的扩增曲线呈阳性反应,其他致病菌均无荧光信号;采用此方法,对30份临床疑似猪链球菌感染样本进行检测,发现有27份样本为阳性,比采用国标法检测得到的结果更加灵敏。结果表明,建立的FQPCR方法具有灵敏性高、重复性好、特异性强等特点,可用于猪链球菌的快速诊断和检测。

主 题 词：荧光定量PCR 猪链球菌 检测 探针 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-944X.2017.12.024

馆 藏 号：203280287...