新城疫病毒3种检测方法的研究比较

作     者：郭浩 邹明强 于东升 刘小雷 云彩麟 杜景娇 GUO Hao;ZOU Ming-qiang;YU Dong-sheng;LIU Xiao-lei;YUN Cai-lin;DU Jing-jiao

作者机构：中国检验检疫科学研究院北京100123 内蒙古医学院呼和浩特010059 内蒙古精神卫生中心呼和浩特010010 大连医科大学大连116044 

出 版 物：《中国生物工程杂志》 (China Biotechnology)

年 卷 期：2011年第31卷第10期

页      码：68-74页

摘      要：目的:利用3种方法对新城疫(Newcastle disease virus,NDV)病毒进行检测并对这3种检测方法的优缺点做出比较。方法:分别将NDV强毒F48E9和弱毒Lasota接种SPF鸡胚后,获取尿囊液。利用双抗夹心ELISA法、悬液芯片系统以及RT-PCR进行检测。通过对制备的针对新城疫病毒的抗体4D9和6C4蛋白浓度测定后,选择6C4进行生物素标记,将4D9作为固相捕获抗体,利用生物素-链霉亲和素放大系统构建双抗夹心检测体系。通过对Genebank上已发表的新城疫强弱毒F基因进行电脑分析后,设计一组针对NDV强弱毒的通用型引物,分别对强弱毒进行RT-PCR并检测其检出限。结果:ELISA法对NDV强弱毒尿囊液的检出灵敏度为1∶160,但操作繁琐,耗时长;液相芯片对强弱毒尿囊液的检出限为1∶160和1∶320,然而和ELISA相比,操作较为方便,但仪器设备昂贵。RT-PCR对强弱毒RNA检出限分别为259pg和14pg,与前两种方法相比,PR-PCR在核酸水平上对病毒进行检测,理论上灵敏度较高,但是所需试剂、设备昂贵,且实验人员还需一定的技能培训。

主 题 词：新城疫 ELISA 悬液芯片 RT-PCR 

学科分类：08[工学] 09[农学] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.13523/j.cb.20111013

馆 藏 号：203280333...