应用RNA干扰沉默猪内源性反转录病毒

作     者：孙宇 马玉媛 罗佳 章金刚 SUN Yu;MA Yu-Yuan;LUO-Jia;ZHA NG Jin-Gang

作者机构：军事医学科学院野战输血研究所北京100850 解放军第305医院检验科北京100017 广西大学兽医学院广西南宁530004 

基　　金：国家自然科学基金(3107185) 

出 版 物：《生物技术通讯》 (Letters in Biotechnology)

年 卷 期：2012年第23卷第1期

页      码：52-55页

摘      要：目的:尝试应用RNA干扰(RNAi)沉默猪源PK-15细胞中的猪内源性反转录病毒(PERV),并通过反转录酶活性及pol基因相对荧光定量PCR检测沉默效果。方法:依据GenBank公布的PERV pol基因序列,采用Invitro-gen公司的BLOCK-iT RNAi Designer软件设计Stealth小干扰RNA(siRNA)序列;将合成的siRNA转染PK-15细胞,72 h后检测细胞上清PERV反转录酶活性及细胞内pol基因拷贝数并评价沉默效果。结果:反转录酶活性及pol基因拷贝数检测结果表明,设计的3条Stealth siRNA序列中,位于pol基因3272～3296 bp的序列能有效沉默PERV。结论:RNAi方法可有效使猪源PK-15细胞中的PERV沉默,为进一步研究天然抗病毒分子与PERV的相互作用提供了实验基础,同时也为猪源异种移植研究中去除PERV提供了一种可供尝试的方法。

主 题 词：RNA干扰 基因沉默 猪内源性反转录病毒 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1009-0002.2012.01.014

馆 藏 号：203280338...