一种双脱氧核苷封闭的寡聚核苷酸制备方法

作     者：张梦玲 胡轶红 朱小立 张驰宇 Mengling Zhang;Yihong Hu;Xiaoli Zhu;Chiyu Zhang

作者机构：上海大学生命科学学院上海200025 中国科学院上海巴斯德研究所病原诊断中心上海200031 

基　　金：国家科技重大专项("艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治" No.2017ZX10101001-005-001 No.2017ZX10103009-002) 

出 版 物：《生物技术》 (Biotechnology)

年 卷 期：2017年第27卷第6期

页      码：545-551页

摘      要：[目的]建立一种高效、简便制备双脱氧核苷(ddATP、ddTTP、ddGTP和ddCTP)封闭寡聚核苷酸的方法。[方法]选取乙醛脱氢酶(ALDH)基因,设计特异性上、下游引物。使用末端转移酶和碱性磷酸酶对引物进行双脱氧核苷修饰,利用荧光定量PCR对制备的封闭引物进行验证,并结合校读PCR对突变体进行检测。[结果]经过ddNTP封闭的引物,在普通荧光PCR体系中无法进行引物延伸;在校读PCR体系中则可以区分ALDH2的两种等位基因。[结论]该方法可以高效合成4种双脱氧核苷封闭的寡聚核苷酸,并且这种封闭的引物可以结合校读PCR对单核苷多态性进行检测。

主 题 词：末端转移酶 磷酸酶 双脱氧核苷 寡聚核苷酸 单核苷酸多态性 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 071010[071010] 081704[081704] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 

D　O　I：10.16519/j.cnki.1004-311x.2017.06.0087

馆 藏 号：203280378...