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体外沉默二牛龙牛儿基转移酶Ⅰ对舌癌细胞迁移和侵袭的影响

体外沉默二牛龙牛儿基转移酶Ⅰ对舌癌细胞迁移和侵袭的影响

作     者:陈正岗 王树人 李敬华 韩金宏 王奇民 童磊 刘文君 杨芳 郭庆圆 郭大伟 王莹 Chen Zhenggang;Wang Shuren;Li Jinghua;Han Jinhong;Wang Qimin;Tong Lei;Liu Wenjun;Yang Fang;Guo Qingyuan;Guo Dawei;Wang Ying

作者机构:青岛市市立医院口腔科青岛266071 上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面外科上海200011 胶州市人民医院口腔科胶州266300 青岛市市立医院中心实验室青岛266071 烟台市口腔医院烟台264008 青岛市市立医院耳鼻喉科青岛266071 济南市第四人民医院口腔科济南250031 潍坊医学院口腔医学院潍坊261021 

基  金:国家自然科学基金面上项目(81372908) 青岛市卫计委计划项目(2014-WJZD009,2013-WSZD011) 

出 版 物:《华西口腔医学杂志》 (West China Journal of Stomatology)

年 卷 期:2017年第35卷第6期

页      码:576-582页

摘      要:目的应用RNA干扰技术,体外沉默二牛龙牛儿基转移酶Ⅰ(GGTase-Ⅰ),研究其在舌癌迁移、侵袭中的作用。方法登录Genebank确定人GGTase-Ⅰ基因序列,针对GGTase-Ⅰ的基因序列设计并构建3条si RNA,分别将RNA干扰组(GGTase-Ⅰsi RNA1、GGTase-Ⅰsi RNA2、GGTase-Ⅰsi RNA3)、阴性对照组(NC-si RNA)和空白对照组转染至舌癌细胞Cal-27,实时定量聚合酶链反应(q RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞转染后GGTase-Ⅰ、Rho A基因的m RNA、蛋白表达;选取沉默效率最高的一组si RNA作为实验组,蛋白质印迹法检测各组细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达,GST-pull down实验检测GTP-Rho A蛋白的表达,划痕实验检测细胞迁移能力变化,Transwell小室检测细胞侵袭能力变化。结果干扰后细胞的GGTase-Ⅰm RNA、蛋白表达明显下降(P<0.05),Rho A m RNA和蛋白表达无明显改变,MMP-2、MMP-9、GTP-Rho A的表达下降,迁移、侵袭能力明显下降(P<0.05)。结论抑制GGTase-Ⅰ表达,可降低舌癌细胞的迁移、侵袭能力,对GGTase-Ⅰ的深入研究可能为舌癌的治疗提供新的有效分子靶点。

主 题 词:二牛龙牛儿基转移酶I RhoA 舌癌 迁移 侵袭 基质金属蛋白酶-2 基质金属蛋白酶-9 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.7518/hxkq.2017.06.003

馆 藏 号:203280454...

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