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荧光定量PCR检测卡他莫拉杆菌感染的实验室诊断方法学建立及应用

荧光定量PCR检测卡他莫拉杆菌感染的实验室诊断方法学建立及应用

作     者:史大伟 蔚然 高琦 王良玉 窦海伟 胡文娟 向莉 辛德莉 郭东星 Shi Dawei;Wei Ran;Gao Qi;Wang Liangyu;Dou Haiwei;Hu Wenjuan;Xiang Li;Xin Deli;Guo Dongxing

作者机构:首都医科大学附属北京友谊医院儿科北京100050 首都医科大学附属北京友谊医院 北京热带医学研究所 热带病防治研究北京市重点实验室 首都医科大学附属北京儿童医院 

基  金:首都市民健康项目培育(Z131100006813044)The Fund Sponsorship of the Capital Public Health Project 

出 版 物:《国际儿科学杂志》 (International Journal of Pediatrics)

年 卷 期:2017年第44卷第10期

页      码:707-709,713页

摘      要:目的 建立荧光定量PCR检验卡他莫拉杆菌的实验室诊断方法并检验临床样本.方法 针对卡他莫拉杆菌外膜蛋白COPB设计引物及探针;构建含卡他莫拉杆菌目的基因片段的质粒,梯度稀释后作为标准品,绘制标准曲线;验证实验方法的敏感性;通过检测7种病原体标准株验证该方法的特异性.用新建荧光定量PCR检测321例诊断为哮喘的儿童患者咽拭子标本.结果 绘制新建荧光定量PCRTaqman探针法检测质粒标准品的标准曲线,新建实验室诊断方法的敏感性可达10拷贝/反应,研究方法可成功区分卡他莫拉杆菌与其他6种病原体DNA.检测321例临床咽拭子样本,卡他莫拉杆菌阳性25例,阳性检出率为7.79%.结论 新建荧光定量PCR法具有较高的灵敏度、特异性,能简单、快速、准确、灵敏地检测卡他莫拉杆菌,可以应用于临床样本的检测.

主 题 词:卡他莫拉杆菌 儿童呼吸道感染 荧光定量PCR 

学科分类:1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

D O I:10.3760/cma.j.issn.1673-4408.2017.10.013

馆 藏 号:203280711...

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