双重RT-PCR方法检测猪流感病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒

作     者：罗俊 刘业兵 陈坚 宁宜宝 LUO Jun;LIU Ye-bing;CHEN Jian;NING Yi-bao

作者机构：中国兽医药品监察所北京100081 北京信得威特科技有限公司北京100302 广东永顺生物制药有限公司广东广州511356 

基　　金：2010年公益性行业(农业)科研专项(201003010-3) "十一五"国家科技支撑计划(2007BAD86B04-4) 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2010年第32卷第9期

页      码：687-690页

摘      要：为建立特异、敏感的猪流感病毒(SIV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的双重RT-PCR检测方法,本研究根据GenBank登录的SIVM基因保守序列和PRRSV美洲型毒株的N基因保守序列,设计合成了2对特异引物,通过对扩增条件的优化,建立检测SIV和PRRSV的双重RT-PCR方法。检测结果显示:该方法可同时扩增出SIV(345bp)和PRRSV(520bp)的特异性片段;而猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型及阴性鸡胚尿囊液核酸扩增结果均为阴性;对SIV和PRRSV2种病毒混合液的最小检出量分别为102EID50/0.1mL和103TCID50/0.1mL。应用双重RT-PCR和病毒分离法对12份临床疑似样品进行对比检测,结果表明:除双重RT-PCR检测到双阳性的3份混合感染病料中1份未分离到PRRSV外,其余2份均分离出病毒。证明该方法具有良好的特异性、敏感性,可以用于临床样品的早期快速检测。

主 题 词：猪流感病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 双重RT-PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0589.2010.09.07

馆 藏 号：203281247...