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肠侵袭性大肠杆菌DPO-PCR检测方法的建立与应用

肠侵袭性大肠杆菌DPO-PCR检测方法的建立与应用

作     者:李丹丹 徐义刚 邱索平 王昱 高会江 高慎阳 LI Dan-dan;XU Yi-gang;QIU Suo-ping;WANG Yu;GAO Hui-jiang;GAO Shen-yang

作者机构:海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心海口570311 黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心哈尔滨150001 从化出入境检验检疫局从化510900 重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心重庆404100 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所牛遗传育种研究室北京100193 辽宁医学院畜牧兽医学院锦州121001 

基  金:海南省社会发展科技专项(2015SF29) 国家质检总局科技项目(2013IK031 2013IK051 2015IK089) 重庆市科技计划项目(cstc2014yykfA80017) 海南省应用技术研究与开发专项项目(ZDXM20130025) 广东检验检疫局科技计划项目(2011GDK44 2013GDK04) 

出 版 物:《中国人兽共患病学报》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期:2015年第31卷第9期

页      码:826-830页

摘      要:目的为建立肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)的DPO-PCR快速检测方法。方法本研究以EIECipaH基因为靶基因设计了一对双启动寡核苷酸(DPO)引物,建立了EIEC DPO-PCR检测方法。结果退火温度范围在47℃~67℃内都能有效地扩增出目的基因,表明该检测方法对退火温度不敏感;该DPO引物仅与EIEC的扩增反应呈阳性,而与其他菌株无非特异性扩增反应,表明该方法特异性强;该方法的灵敏度为1.17×102 cfu/mL。利用该检测方法对采集的230份样品进行检测,共计检出3份EIEC阳性样品,与国标法(GB 4789.6-2003)检测结果一致,显示了良好的实用性。结论该DPO-PCR方法设计简单、特异性强,具有良好的实用性。

主 题 词:肠侵袭性大肠杆菌 ipaH基因 DPO-PCR 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1002-2694.2015.09.009

馆 藏 号:203281386...

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