鹅新城疫病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立

作     者：刘文俊 黄运茂 阳佑天 许丹宁 曹楠 周德荣 田允波 LIU Wenjun;HUANG Yunmao;YANG Youtian;XU Danning;CAO Nan;ZHOU Derong;TIAN Yunbo

作者机构：仲恺农业工程学院广东省水禽健康养殖重点实验室广州510225 佛山科学技术学院佛山528000 

基　　金：广东省科技计划(2017A020208069) 广东省普通高校青年人才创新项目(20161076) 广东大学生科技创新攀登计划专项(pdjh2016b0243) 

出 版 物：《中国畜牧兽医》 (China Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2018年第45卷第1期

页      码：22-31页

摘      要：本研究拟建立一种能在基层实时、便捷诊断鹅新城疫病毒(goose Newcastle disease virus,GNDV)的检测方法。根据GenBank中公布的GNDVF基因的高度同源保守序列设计特异性引物,并在反应体系中添加钙黄绿素/氯化锰指示剂,建立可视化RT-LAMP检测方法。结果显示,建立的方法能特异地检测出GNDV及NDV Lasota疫苗株,而小鹅瘟病毒(GPV)、禽流感病毒(AIV)、鸭坦布苏病毒(DTMUV)等其他病毒均为阴性。所建立的GNDV可视化RT-LAMP检测方法对RNA的最低检测限为10pg,反应过程不需PCR仪等复杂的仪器,50min即可完成反应,可经肉眼观察反应体系颜色判定结果。该方法特异性强、灵敏度高,且操作安全、简便、快捷,可满足基层筛查GNDV的需求。

主 题 词：鹅新城疫病毒(GNDV) 环介导等温扩增(LAMP) 钙黄绿素 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16431/j.cnki.1671-7236.2018.01.003

馆 藏 号：203282232...