重组人神经生长因子在大肠埃希菌中的表达及活性测定

作     者：沈丽 黄志立 蒋伟 林钰琼 王妍 SHEN Li;HUANG Zhi-li;JIANG Wei;LIN Yu-qiong;WANG Yan

作者机构：深圳职业技术学院应用化学与生物技术学院广东深圳518055 

基　　金：深圳市科技创新委项目(JCYJ20140718171752670 JCYJ20170306144523128 CXZZ20120619162250509) 

出 版 物：《中国生物制品学杂志》 (Chinese Journal of Biologicals)

年 卷 期：2018年第31卷第2期

页      码：134-139页

摘      要：目的在大肠埃希菌中表达重组人神经生长因子(recombinant human nerve growth factor,rhNGF),并检测其活性。方法通过密码子优化,设计表达rhNGF的基因,构建重组表达质粒pET-28a(+)-hNGF,转化大肠埃希菌BL21pLyS(DE3)中,IPTG诱导表达。表达的蛋白经层析纯化后,SDS-PAGE及HPLC法检测纯度,Lowry法检测蛋白浓度,TF-1细胞增殖法检测生物学活性。结果构建了融合表达rhNGF的大肠埃希菌表达系统,表达的3批外源蛋白纯化后纯度均达到100%,比活分别为5.5×10~5、6.8×10~5和7.4×10~5 IU/mg,均高于小鼠颌下腺提取的NGF标准品。结论成功表达了rhNGF,纯化后纯度高,比活强,为规模化生产hNGF提供了参考。

主 题 词：神经生长因子 大肠埃希菌 表达 活性 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0703[理学-化学类] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.13200/j.cnki.cjb.002073

馆 藏 号：203282322...