Ⅰ型人类免疫缺陷病毒tat基因重组慢病毒表达载体的构建

作     者：陈玉礼 韦红玉 唐华英 赵丽娟 曾怡 Chen Yuli;Wei Hongyu;Tang Huaying;Zhao Lijuan;Zeng Yi

作者机构：右江民族医学院病原生物学与免疫学教研室广西百色533000 

基　　金：广西自然科学基金2014GXNSFAA118136 

出 版 物：《右江民族医学院学报》 (Journal of Youjiang Medical University for Nationalities)

年 卷 期：2017年第39卷第6期

页      码：444-447页

摘      要：目的构建人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)tat基因重组慢病毒表达载体。方法将pCDH-GFP和pCDHRFP载体分别用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切制备线性化载体;通过设计引物及PCR扩增,获得5′端与3′端分别与15nt线性化载体3′端与5′端互补的tat基因片段;tat基因片段和线性化载体经纯化后,进行重组反应;将重组产物转化感受态细胞DH5α,通过菌落PCR、质粒双酶切、序列测定等方法鉴定重组克隆。结果菌落PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,在约354bp位置出现预期的条带;EcoRⅠ和HindⅢ双酶切重组质粒经琼脂糖凝胶电泳,在约7544bp和354bp位置上出现预期条带;通过测序,重组质粒中插入的tat基因序列与GenBank基因库中的HIV-1tat基因序列同源。结论采用本研究方法能成功构建HIV-1tat基因重组慢病毒表达载体。

主 题 词：人免疫缺陷病毒1型 tat基因 重组慢病毒表达载体 

学科分类：1004[医学-公共卫生预防医学类] 100401[100401] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1001-5817.2017.06.005

馆 藏 号：203282616...