EV71抗原双元植物表达载体构建及生菜瞬时表达

作     者：罗雯 艾佐佐 刘艳梅 刘旺喜 Wen Luo;Zuozuo Ai;Yanmei Liu;Wangxi Liu

作者机构：南昌师范学院生物系江西南昌330032 

基　　金：江西省自然科学基金面上项目("EV71病毒样颗粒在植物中的表达及其活性分析" No.20151BAB205063) 

出 版 物：《生物技术》 (Biotechnology)

年 卷 期：2018年第28卷第1期

页      码：18-23,29页

摘      要：[目的]构建EV71 P1和3CD基因的双元植物表达载体,通过农杆菌注射渗透法实现在生菜叶片中的瞬时共表达。[方法]根据Gen Bank序列,设计合成EV71 C4亚型P1和3CD基因,分步克隆入植物表达载体p CAMBIA2301,并转化农杆菌LBA4404。农杆菌注射渗透法对意大利生菜叶片进行遗传转化,固相酶联斑点实验和免疫印迹实验检测感染叶片总蛋白提取物,分析外源基因表达效果。[结果]限制酶切验证获得共表达植物表达载体p CAMBIA2301-P1-3CD。感染叶片的外源基因表达产物中具有抗VP1抗体结合活性的蛋白,其分子量约39 k Da。[结论]成功构建EV71 3CD和P1基因双元植物表达载体,其在意大利生菜叶片中的表达产物具有免疫反应性。为利用植物生物反应器生产抗EV71口服疫苗提供了理论和实验依据。

主 题 词：肠道病毒71型 植物双元表达载体 生菜 瞬时表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.16519/j.cnki.1004-31lx.2018.01.0004

馆 藏 号：203282738...