沉默C-SKI对大鼠心肌细胞H9C2细胞增殖与侵袭能力的影响研究

作     者：凌佳 蔡振荣 庄晓华 阚丽虹 汪飞 叶小磊 Lin Jia;Cai Zhenrong;Zhuang Xiaohua;Kan Lihong;Wang Fei;Ye Xiaolei

作者机构：复旦大学附属浦东医院心内科上海200000 宁波市医学科学研究所药物与药理研究室浙江宁波315000 

基　　金：浦东新区卫生系统优秀青年医学人才培养计划(编号:PWRq2014-03) 

出 版 物：《贵州医药》 (Guizhou Medical Journal)

年 卷 期：2018年第42卷第1期

页      码：6-8,F0003页

摘      要：目的通过慢病毒载体沉默心肌细胞细胞系H9C2中C-SKI(c-ski)基因的表达,探讨C-SKI基因沉默后对心肌细胞细胞增殖、凋亡及迁移的调控作用。方法应用RT-PCR及蛋白质印迹方法检测SW620,HT-29,LoVo,H9C2及RKO细胞系中C-SKI的表达状况;设计人C-SKI基因的shRNA慢病毒载体,在293T细胞中包装病毒并感染C-SKI高表达的心肌细胞细胞系,运用蛋白质免疫印迹的方法鉴定其对C-SKI基因的沉默效果;C-SKI基因沉默后通过MTT实验检测其对细胞增殖能力的影响,并应用Transwell迁移实验检测细胞的体外侵袭迁移能力。结果 C-SKI在H9C2中高表达,构建C-SKIshRNA慢病毒载体沉默H9C2细胞中C-SKI的表达,蛋白质免疫印迹结果提示,C-SKI稳定沉默的H9C2细胞构建成功。在稳定沉默C-SKI基因后,MTT法显示C-SKI沉默不会影响细胞的增殖能力。细胞小室实验结果显示,C-SKI沉默后H9C2侵袭和迁移能力均增强(P<0.001)。结论C-SKI基因能够一定程度上抑制心肌细胞的迁移和侵袭,进而参与了心肌细胞纤维化的发生发展。

主 题 词：心肌细胞 C-SKI 细胞增殖 迁移 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-744X.2018.01.002

馆 藏 号：203282783...