利用3D打印高通量观察斑马鱼肾小球滤过膜损伤

作     者：陈朝红 张利文 侯庆 汪玲 李知 秦卫松 刘志红 CHEN Zhaohong;ZHANG Liwen;HOU Qing;WANG Lin;LI Zhi;QIN Weisong;LIU Zhihong

作者机构：南京总医院国家肾脏疾病临床医学研究中心全军肾脏病研究所南京210016 

基　　金：国家重点研发计划项目(2016YFC0904103) 国家自然科学基金面上项目(81470943) 国家科技支撑课题(2015BAI12B02 2015BAI12B05) 

出 版 物：《肾脏病与透析肾移植杂志》 (Chinese Journal of Nephrology,Dialysis & Transplantation)

年 卷 期：2018年第27卷第1期

页      码：7-11页

摘      要：目的:使用桌面3D打印机制备兼容微孔板和平皿的斑马鱼定向工具,用于观察分析斑马鱼足细胞损伤后表型。方法:构建足细胞特异性表达硝基还原酶(NTR)的转基因斑马鱼Tg(pod:Gal4;UAS:NTR-mCherry),NTR/MTZ(甲硝唑)系统特异性诱导足细胞损伤,破坏肾小球滤过膜;应用Open SCAD软件设计模具的3D模型,打印材料为丙烯腈-丁二烯-苯乙烯;结合3D模具和全自动体式显微镜对足细胞特异性损伤斑马鱼进行高通量筛查,对水肿比例和严重程度,蛋白尿程度进行定量分析。结果:桌面3D打印机制备的模具在微孔板或平皿内的琼脂凝胶中形成腔室,可排列48或96个斑马鱼胚胎样本。狭长的微腔确保斑马鱼胚胎方向和体位一致且不易移动。全自动显微镜获取排列在微腔内斑马鱼胚胎的侧面和背面视图,易于观察分析斑马鱼形态、荧光分布和强度。结论:本研究应用3D打印机制备模具,高通量定位观察斑马鱼水肿率和蛋白尿表型,是斑马鱼肾脏功能研究的有效工具。

主 题 词：斑马鱼 高通量筛选 3D打印技术 足细胞 蛋白尿 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100210[100210] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1006-298X.2018.01.002

馆 藏 号：203283296...