利用CAL-1-L929细胞建立一种抑制性寡聚脱氧核苷酸筛选体系

作     者：孙然 李春梅 张永胜 张乐宁 时景伟 Sun Ran;Li Chunmei;Zhang Yongsheng;Zhang Lening;Shi Jingwei

作者机构：吉林大学中日联谊医院科学研究中心长春130033 吉林大学中日联谊医院胸外科长春130033 吉林大学中日联谊医院检验科长春130033 吉林省疾病预防控制中心长春130021 吉林大学第一医院生殖中心长春130021 

基　　金：国家自然科学基金(81601756) 吉林省教育厅“十三五”科学技术研究规划项目(JJKH20170830KJ) 中国博士后科学基金(2017M611328) 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2018年第35卷第2期

页      码：326-327页

摘      要：目的利用树突状细胞CAL-1的肿瘤坏死因子-α（TNF—α）检测平台，以进一步应用于抑制性寡聚脱氧核苷酸的筛选。方法以含有未甲基化CpG基序的寡聚脱氧核苷酸CpG（CpGODN）0800（3μg／ml）作为刺激剂，将其作用CAL-1细胞（2×10^5个细胞／孔），48h后收集上清，作用于L929细胞（2×10^4个细胞／孔））。培养18h，加入水疱性口炎病毒（VSV），培养72h，检测570nm处的吸光度值。结果筛选条件确定为CpGODN0800终质量浓度为3μg／ml，CAL-1上清液1：5倍稀释。L929细胞数在2×10^4个细胞／孔），反应时间为24h。应用此条件成功筛选小自行设计的抑制性ODN—SAT05f。结论建立实验体系，成功检测了自行设计的抑制ODN和CpGODN诱导的CAL-1细胞的TNF—α的生物学活性。

主 题 词：抑制性寡聚脱氧核苷酸 Toll样受体配体 CAL-1细胞 肿瘤坏死因子-α 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100101[100101] 10[医学] 

D　O　I：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2018.02.041

馆 藏 号：203283401...