实时定量PCR检测流感嗜血杆菌感染实验室诊断方法的建立

作     者：蔚然 王良玉 高琦 胡文娟 窦海伟 向莉 辛德莉 郭东星 WEI Ran;WANG Liangyu;GAO Qi;HU Wenjua;DOU Haiwei;XIANG Li;XIN Deli;GUO Dongxing

作者机构：首都医科大学附属北京友谊医院/北京热带医学研究所北京100050 首都医科大学附属北京儿童医院北京100050 

基　　金：首都市民健康培育项目(Z161100000116088 Z131100006813044) 

出 版 物：《检验医学与临床》 (Laboratory Medicine and Clinic)

年 卷 期：2018年第15卷第6期

页      码：737-739,743页

摘      要：目的建立SYBR-Green染料法实时定量聚合酶链反应(PCR)检测流感嗜血杆菌(Hi)感染的实验室诊断方法。方法设计合成针对Hi fucK基因的引物;扩增Hi fucK基因,构建质粒,10倍梯度稀释后,以10~108 copy/反应作为标准品绘制标准曲线,并检验新建实验室诊断方法的敏感度;采用实验室保存的肺炎支原体标准株、人型支原体标准株、阴沟肠杆菌标准株、金黄色葡萄球菌标准株、肺炎克雷伯菌标准株和大肠埃希菌标准株的DNA标本,检验新建实验室诊断方法的特异度;将新建立的实验室诊断方法,应用于临床标本的检验。结果新建实验室诊断方法敏感度较高,其可检测到拷贝数为10copy的Hi DNA;具有较高特异度,可成功区别于几种病原体DNA;将该方法应用于226份临床咽拭子标本的检测,检出Hi感染92份,阳性率为40.70%。结论该研究建立的实时定量PCR检测Hi感染的方法,具有较高的敏感度和特异度,操作简单,用时较短,可用于临床Hi感染的实验室诊断。

主 题 词：流感嗜血杆菌 儿童 呼吸道感染 实时定量聚合酶链反应 

学科分类：1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1672-9455.2018.06.001

馆 藏 号：203284680...